專用(yòng)血清能為細胞提供必要的營養和生長因子
,促進細胞生長和增殖
,常被用(yòng)於(yú)細胞培養
、免疫學實驗、生物化(huà)學實驗以及(jí)藥(yào)理(lǐ)學和毒(dú)理(lǐ)學實驗等
。在儲存時
,通常需要將其置於(yú)-15℃至(zhì)-20℃的環境中,以保持其活性(xìng)和穩定性(xìng)。
專用(yòng)血清在使(shǐ)用(yòng)過(guò)程中可能會遇到問題
,這些問題可能會影(yǐng)響實驗結果的準確性(xìng)和重復(fù)性(xìng)
。以下是幾種常見的問題及(jí)其相應的解決方法。

1
、沈澱(diàn)現(xiàn)象(xiàng)
問題描述
:
在儲存或(huò)使(shǐ)用(yòng)過(guò)程中
,有時會發(fā)現(xiàn)血清中出現(xiàn)不溶性(xìng)的沈澱(diàn)物
。這通常不會影(yǐng)響質量
,但可能會引起擔憂。
解決方法:
適當處理(lǐ)
:輕(qīng)微的沈澱(diàn)可以通過(guò)緩慢解凍後輕(qīng)輕(qīng)搖晃來分散
。如果沈澱(diàn)較多,可以將血清加熱至(zhì)56°C並持續30分鐘進行滅活處理(lǐ),之後再通過(guò)過(guò)濾去除(chú)沈澱(diàn)
。
避免反復(fù)凍融:盡量減少血清的反復(fù)凍融次數,因為每次凍融都(dōu)會增加沈澱(diàn)形成的可能性(xìng)。
2
、細胞生長不良
問題描述
:
即使(shǐ)添加了適量的血清
,細胞仍然(rán)表現(xiàn)出生長遲緩或(huò)形態異常的現(xiàn)象(xiàng)。
解決方法:
檢查血清質量:確認所(suǒ)使(shǐ)用(yòng)的血清是否符合預期的質量標準,特別是內毒(dú)素(sù)水平
、總蛋白含量等關鍵(jiàn)指標 。
優(yōu)化(huà)培養條(tiáo)件
:根據具體的細胞類(lèi)型調整血清濃度
,有時需要嘗試(shì)不同的比例以找到適合的條(tiáo)件
。此外
,確保培養環境(如溫(wēn)度
、pH值)處於(yú)良好狀態也很重要。
3
、內毒(dú)素(sù)污染
問題描述
:
高水平的內毒(dú)素(sù)會導致細胞毒(dú)性(xìng),抑制細胞增殖甚至(zhì)導致細胞死亡。
解決方法:
選擇低內毒(dú)素(sù)血清
:在購買時優(yōu)先選擇經過(guò)嚴格檢測且標明(míng)低內毒(dú)素(sù)水平的產品
。
額外處理(lǐ)
:如果懷疑存在內毒(dú)素(sù)污染
,可以考慮採用(yòng)超濾或(huò)其他物理(lǐ)化(huà)學方法進一步降低內毒(dú)素(sù)含量
。
4
、pH值不穩定
問題描述:
某些情況下
,它可能導致培養基pH值波(bō)動,影(yǐng)響細胞健康
。
解決方法:
緩衝系統調整
:使(shǐ)用(yòng)適當的緩衝體系(如HEPES)可以幫助穩定pH值
。
定期監(jiān)測:定期檢查培養基的pH值,並根據需要調整CO2濃度或(huò)更換新鮮培養基
。
5、微生物污染
問題描述:
儘管大多數商業化(huà)的產品都(dōu)經過(guò)嚴格的無菌處理(lǐ),但仍有可能發(fā)生微生物污染的情況
。
解決方法:
加強無菌操(cāo)作:在處理(lǐ)血清及(jí)配制培養基時嚴格執行無菌技(jì)術,減少外界污染的風險。
二次過(guò)濾:對於(yú)特別敏感的實驗
,可以在加入細胞前對含血清的培養基進行0.2微米過(guò)濾除(chú)菌。
專用(yòng)血清通過(guò)瞭解這些常見問題及(jí)其解決方案(àn),研(yán)究人(rén)員可以更好地應對在使(shǐ)用(yòng)過(guò)程中遇到的各種挑戰
,從而保證實驗順利進行並獲(huò)得可靠的實驗結果
。