對(duì)於
cck8試劑如何進行檢測,小(xiǎo)編髮現有許多用戶都不知道如何進行,那今天呢小(xiǎo)編就此問題以文章的形式給大家講(jiǎng)一講(jiǎng)cck8試劑的檢測步驟吧
cck8試劑檢測步驟
1. 向(xiàng)各孔中加入100 μl細(xì)胞(bāo)懸液(yè)。a) 2. 在37℃下預孵育培養板
。b)
3. 向(xiàng)各孔中加入各濃(nóng)度的待測溶液(yè)c)10 μl。 4. 37℃下孵育
。
5. 向(xiàng)各孔中加入10 μl的cck8試劑溶液(yè)d)。 6. 37℃下孵育1-4小(xiǎo)時
。e) 7. 測定450 nm處的OD值
。
a) 使用適當的培養基(jī)制備50,000-100
,000個/ml的細(xì)胞(bāo)懸液(yè)。 b) 建(jiàn)議使用CO2培養箱過夜預培養
。 c) 使用培養基(jī)或PBS來制備溶液(yè)
。
d) 如果待測溶液(yè)有還原性
,測定不含細(xì)胞(bāo),但含有cck8試劑的待測溶液(yè)在450 nm處的空白(bái)吸光度。如果該(gāi)吸光度很(hěn)小(xiǎo),則(zé)可以直接加入cck8試劑
,如果吸光度相對(duì)較大,則(zé)需(xū)要除去培養基(jī)
,並用培養基(jī)洗(xǐ)滌細(xì)胞(bāo)兩次
,然後加入新的100 μl培養基(jī)和10 μl cck8試劑進行檢測 。 e) 白(bái)細(xì)胞(bāo)可能需(xū)要培養較長(zhǎng)時間(jiān)。
活力計算
細(xì)胞(bāo)活力*(%)=[A(加藥)-A(空白(bái))]/[A(0加藥)-A(空白(bái))] ×100 A(加藥)
:具(jù)有細(xì)胞(bāo)、cck8試劑溶液(yè)和藥物溶液(yè)的孔的吸光度 A(空白(bái)):具(jù)有培養基(jī)和cck8試劑溶液(yè)而(ér)沒有細(xì)胞(bāo)的孔的吸光度 A(0加藥):具(jù)有細(xì)胞(bāo)、cck8試劑溶液(yè)而(ér)沒有藥物溶液(yè)的孔的吸光度 *細(xì)胞(bāo)活力
:細(xì)胞(bāo)增殖活力或細(xì)胞(bāo)毒性活力
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